PEI转染试剂 (高效低毒)
- 031-PEI
- 北京富百科
- 北京市
- 现货
- 10mL
- 50mL
- 1000 元
- 2023-03-17 14:46:12
北京富百科生物技术有限公司
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产品介绍
PEI Transfection Reagent 转染试剂 (高效低毒)
产品简介：
线性化聚乙烯亚胺 PEI转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合带负电荷的核酸分子，形成复合物， 并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂，细胞毒性低，转染效率高，在 293 和 CHO 等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性 PEI 转染试剂广泛适用于多种细胞系包括 293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞等。该试剂与含血清的培养基兼容，能高效的将核酸导入细胞。
产品储存： -20℃保存两年。（4 °C保存有效期2周，不可重新冻存！）
使用方法： DNA的转染 以 6 孔板为例
1. 接种细胞：为了提高转染效率，建议在转染前一天接种细胞，以转染时细胞密度在 70%~80%为宜。
2. 准备 DNA-PEI 复合物：按照以下体系配制 DNA-PEI 核酸-转染试剂复合物：
1） 对于每孔细胞，使用 100 μL 无血清培养基稀释 2 μg 目的DNA ，充分混匀成 DNA 稀释液。
【注】：无血清稀释液建议采用 Opti-MEM 或ddH2O
2） 立刻向 100 μL 的 DNA 稀释液中加入 5 μL 的PEI转染试剂，旋涡 10 秒，充分混匀。
3） 在室温下孵育 10~25 min，使得形成 DNA-PEI 阳离子核酸转染试剂复合物。
3. 转染细胞：
1） 在形成复合物过程中，移除细胞生长培养基，每孔中加入 2 mL 新鲜预热的完全培养基。
2） 直接将 100 μL DNA-PEI 核酸-PEI 复合物加入细胞中，摇动培养板，轻轻混匀。
3）37 ℃，5% CO2 培养箱培养，转染后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。
4. 稳转筛选（可选）
转染 24 h 后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释 10 倍以上），37 ℃，5% CO2 培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：
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培养皿
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表面积（cm2）
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DNA 的量（μg）
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转染试剂的量（μL）
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稀释液体积（μL）
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培养基总量
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96 孔板
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0.3
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0.1
|
0.1
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10
|
100 μL
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48 孔板
|
0.7
|
0.2
|
0.3
|
20
|
200 μL
|
|
24 孔板
|
1.9
|
0.5
|
1
|
50
|
500 μL
|
|
12 孔板
|
3.8
|
1
|
2
|
50
|
1mL
|
|
6 孔板
|
10
|
2
|
4
|
100
|
2 mL
|
|
25cm2 培养瓶
|
21
|
4
|
8
|
200
|
4 mL
|
|
75cm2 培养瓶
|
58
|
10
|
20
|
500
|
10 mL
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注意事项
1） 配置好的 PEI 溶液从-20 ºC 拿出融化后，可放在 4 ºC 冰箱保存，绝不可重新冻存。
2） 对大多数细胞每1μg DNA用3.0 μL PEI 转染试剂。也可以1μg DNA 使用 1.5~4 μL PEI 转染试剂进行优化。
3） 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅。
4） 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程！
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Name
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PEI转染试剂 (高效低毒)
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CAT#
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CAS#
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Storage#
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-20℃
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Shelf Life#
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24months
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Ex(nm)#
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Em(nm)#
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MW#
|
Solvent#
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