一、产品简介

 

离心式快速脱盐预装柱，填料颗粒粒径在57-80微米，适合将分子量在5KD以下的和分子量5KD以上的物质分离开来，对盐和小分子的滞留率在95%以上，几乎等体积回收，样品不会被稀释，可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。

 

无需装柱，代替比较耗时的传统透析处理，以达到快速纯化蛋白质/替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心，即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。

 

二、产品用途

 

1、脱盐

2、置换缓冲液

 

三、工作环境

 

    PH：2-13；温度：4-30ºC

 

四、产品特点

 

1、操作方便，免去了繁琐的透析过程，10分钟内即可完成样品处理。

2、建议一次性使用（也可再生后重复使用），稳定性好，在所用常用缓冲液体（PBS，Tris-Cl、碳酸钠-碳酸氢钠等）中稳定。

3、使用灵活，可根据自身样品体积来适当增减柱体积。

 

五、操作步骤

 

1、取脱盐柱，移去封口。   

2、离心去除储存液。1000×g离心2min，去除储存液。（干粉柱此步骤省略）

3、平衡预装柱。加入350μl样品所需的缓冲液，静置2min，1000×g离心2min。再加入200μl上述缓冲液，重复上述平衡操作2次。

4、样品处理。加入需要处理的蛋白样品，静置30S，1000×g离心2min，收集回收样品，保存备用。

5、脱盐柱的再生和保存

将使用过的脱盐柱，共4次加入200μl含2M NaCl的PBS溶液，静置2min，1000×g离心2min。然后3次加入200μl去离子水，静置2min，1000×g离心2min。

将处理好的脱盐柱，加入20%乙醇溶液，保存即可。

六、回收效果

 

样品脱盐后的回收率与样品的浓度，以及上样体积相关。样品浓度越高，其回收率越高；同时在推荐的样品上样量范围内，上样量约大，其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在80-95%。

 

七、常见问题

 

常见问题	可能原因	解决方法
蛋白回收率偏低	1、蛋白浓度过低（<0.01mg/ml) 2、所置换的缓冲液成分或PH非最适缓冲液，产生了非特异性吸附	1、现对蛋白液进行适当浓缩后脱盐 2、更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次
蛋白回收后出现浑浊或沉淀	1、缓冲液非最适缓冲液 2、缓冲液中的某些离子被除去了，导致蛋白质等电点聚沉	更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次
脱盐不干净	盐离子浓度过高（>0.5M）	根据盐离子浓度适当增加脱盐次数或稀释后脱盐

 

八、运输及储存

 

常温运输及保存，2年有效。

 

九、产品规格

 

产品编号	规格(柱体积）	上样量
P0202-30	0.7ml	100-200ul
P0206-30	1.5ml	200-400ul
P0204-30	3ml	500-1000ul
P0201-30	6ml	1000-2000ul

 

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