C反应蛋白(CRP)
- K1016、K1017
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- 2022-12-13 14:17:48
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C反应蛋白(CRP)
抗体参数
名称
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抗人C反应蛋白抗体(CRP antibody)
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描述
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鼠源单抗,细胞体外培养(cell culture)获得
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应用平台
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免疫荧光、胶体金平台、胶乳比浊
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货号
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K1016
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K1017
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推荐用途
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捕获/包被
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检测/标记
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线性范围
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金标平台:0.4μg/ml-200μg/ml;免疫荧光平台:0.1μg/ml-200μg/ml
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缓冲液
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1xPBS,pH 7.4
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纯度
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ProteinA/G纯化,纯度>98%。
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抗体储存
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避免冻融,分装保存,-20℃或更低温度保存
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抗原参数
名称
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C反应蛋白天然抗原(CRP antigen)
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描述
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天然蛋白
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用途
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质控品,校准品
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货号
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K1916
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纯度
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>90%,评估来源于R250染色的SDS-PAGE胶。
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缓冲液
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1xPBS,pH 7.4
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储存
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-20℃以下三年
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WB
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天然CRP抗原从SDS-PAGE转移到醋酸纤维素膜上后,分别以欧凯CRP配对抗体K1016、K1017检测天然CRP。如WB检测图所示,K1016、K1017均可以识别天然CRP。
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稳定性
|
37℃加速稳定性
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CRP产品数据
胶体金平台
胶体金试纸条
以K1017作为标记抗体,K1016作为包被抗体制备胶体金试纸条。分别检测浓度为0.4μg/ml,1.8μg/ml,6.63μg/ml,14.6μg/ml,22.9μg/ml,39.5μg/ml,57.1μg/ml,112μg/ml的样本,检测结果T线颜色变化明显,呈梯度变化。
图1:胶体金试纸条
免疫荧光平台
临床对比分析
以K1016-K1017配对抗体对制备免疫荧光检测试纸条,检测贝克曼赋值血清样本30例(浓度范围0.1-220μg/ml),样本符合率R2>98%
图2:K1016-K1017免疫荧光平台样本符合率
准确性
将C反应蛋白的国家标准品稀释成20μg/ml-100μg/ml和1μg/ml-10μg/ml两个浓度水平的样本,对每个样品重复测定3次,并根据公式B=(M-T)/T×100%(式中B为相对偏差,M为测量浓度的均值,T为标定浓度)计算相对偏差,相对偏差应不大于15%。
批号
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样本(μg/ml)
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测定1
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测定2
|
测定3
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平均值(μg/ml)
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相对偏差
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标准要求
|
批次1
|
9.84
|
10.95
|
9.19
|
10.46
|
10.20
|
3.66%
|
±15%
|
30.14
|
28.87
|
34.14
|
28.08
|
30.36
|
0.73%
|
||
批次2
|
9.84
|
9.08
|
10.94
|
8.88
|
9.63
|
-2.13%
|
|
30.14
|
30.47
|
26.62
|
27.55
|
28.21
|
-6.40%
|
||
批次3
|
9.84
|
10.40
|
10.77
|
8.50
|
9.89
|
0.51%
|
|
30.14
|
28.52
|
26.43
|
33.88
|
29.61
|
-1.76%
|
重复性
用C反应蛋白浓度为20μg/ml-100μg/ml和1μg/ml-10μg/ml的两个水平的企业参考品为样本,重复测定各10次, 计算测量值的平均值()和标准差(s)。按公式CV=(S / )×100%,计算变异系数(CV),结果应不大于15%。
低值样本
(9.84μg/ml) |
高值样本
(30.14μg/ml) |
|
测定1
|
10.20
|
33.93
|
测定2
|
8.99
|
32.21
|
测定3
|
10.08
|
34.44
|
测定4
|
10.56
|
27.08
|
测定5
|
9.79
|
32.14
|
测定6
|
10.35
|
33.98
|
测定7
|
9.12
|
30.08
|
测定8
|
8.55
|
30.15
|
测定9
|
9.40
|
33.72
|
测定10
|
10.77
|
30.99
|
平均值(μg/ml)
|
9.78
|
31.87
|
SD
|
0.738
|
2.328
|
CV
|
7.55%
|
7.30%
|
标准要求
|
±15%
|
胶乳比浊平台
校准曲线
将K1016、K1017配对抗体对与胶乳微球偶联制备R2试剂,R1试剂为缓冲液,应用日立7080仪器进行C反应蛋白(CRP)校准品的定量检测,如图3。
图3:校准曲线
线性范围
以CRP胶乳比浊试剂检测6个质控品浓度。如下表和图4所示,线性范围可达到0.1-200μg/ml。
以CRP胶乳比浊试剂检测6个质控品浓度。如下表和图4所示,线性范围可达到0.1-200μg/ml。
理论值
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测试1
|
测试2
|
均值
|
---|---|---|---|
1.40
|
1.60
|
1.20
|
1.40
|
20.91
|
19.32
|
21.07
|
20.20
|
40.43
|
39.22
|
37.02
|
38.12
|
76.45
|
75.80
|
72.80
|
74.30
|
151.50
|
148.25
|
157.36
|
152.81
|
301.60
|
318.76
|
306.74
|
312.75
|
图4:线性范围
临床对比分析
CRP胶乳比浊试剂盒测定三甲医院赋值临床血清样本60例,测定结果样本符合率R2>99%。
图5:临床对比分析
试用申请
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CRP临床诊断意义
C反应蛋白(CRP)专题
C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是一种结构为正五聚体的急性时相蛋白,具有很好的稳定性及精确性,是炎症和组织损伤的非特异性标志物1。人类的CRP由5个相同的非糖基化多肽亚基组成,每个亚基包含206个氨基酸残基和两个钙离子结合位点1。
C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是一种结构为正五聚体的急性时相蛋白,具有很好的稳定性及精确性,是炎症和组织损伤的非特异性标志物1。人类的CRP由5个相同的非糖基化多肽亚基组成,每个亚基包含206个氨基酸残基和两个钙离子结合位点1。
CRP由肝细胞合成并且受到几种细胞因子的转录调控,如白细胞介素(IL)-6、IL-1、肿瘤坏死因子、干扰素等2。也有证据表明CRP可能在动脉粥样硬化病变的血管平滑肌细胞(SMC)和巨噬细胞中局部产生。关于CRP本身是否是动脉粥样硬化血栓形成的致病因素一直存在争议。就现有的数据可以表明五聚体CRP主要是心血管疾病的生物标志物,而不是致病因素。该数据强调了将上游炎症介质作为心血管疾病的潜在治疗方法的重要性3。
高敏C-反应蛋白(hsCRP)
美国心脏协会(AHA)和疾病控制与预防中心(CDC)在对炎症标志物与心血管疾病之间的关联进行系统评估后,建议将hsCRP作为预测心血管疾病的标志物4-6。高敏CRP(hsCRP)与CRP是同一种蛋白。hsCRP在低浓度(1-10mg/L)范围内具有更高的敏感性和准确性,而常规CRP的可检测范围一般为10-200mg/L,其弥补了常规CRP的检测范围的局限性以及提高心血管疾病预测的潜在风险性。AHA/CDC对心血管疾病风险评估指南如下:hsCRP水平<1 mg/L,低风险;1 mg/L<hsCRP水平<3 mg/L,中等风险;hsCRP水平>3 mg/L,高风险3,6。
参考文献
1.Pepys M B, Hirschfield G M. C-reactive protein: a critical update.[J]. Journal of Clinical Investigation, 2003, 111(12):1805-12.
2.Koenig W, Khuseyinova N. Biomarkers of atherosclerotic plaque instability and rupture.[J]. Arteriosclerosis Thrombosis & Vascular Biology, 2007, 27(1):15-26.
3.Ridker P M. A Test in Context, : High-Sensitivity C-Reactive Protein[J]. Journal of the American College of Cardiology, 2016, 67(6):712.
4.Sang W, Dae J, Park, et al. Evaluation of fluorescence hs-CRP immunoassay for point-of-care testing[J]. Clinica chimica acta; international journal of clinical chemistry, 2005, 356(1-2):172.
5.Paz J C, West M P. Acute Care Handbook for Physical Therapists (Fourth Edition)[M]. 2013.
6.Pearson T A, Mensah G A, Alexander R W, et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice: a statement for healthcare professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association[J]. Circulation, 2003, 107(3): 499-511.
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