尽管靶向T细胞抑制性受体的免疫检查点抑制剂已在临床上成功应用，但是肿瘤常常会通过多种机制来逃逸或破坏抗肿瘤T细胞反应。在肿瘤微环境中，肿瘤相关巨噬细胞（TAM）可抑制T细胞反应并通过多种方式促进肿瘤生长，最终减弱对T细胞检查点抑制剂的响应。于是，科学家们开始探索如何化敌为友，将免疫抑制性TAM转化成免疫激活型巨噬细胞。

VSIG4（V-set and immunoglobulin domain-containing 4），也被称为CRIg，正常情况下特异性的表达在组织驻留巨噬细胞（tissue resident macrophage）表面，如肝Kupffer细胞、腹水巨噬细胞、胰腺巨噬细胞、关节滑膜巨噬细胞和心脏间质巨噬细胞等。在多种肿瘤中发现VSIG4的表达上调，包括肺癌、乳腺癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤和脑胶质瘤。肿瘤组织中，VSIG4主要表达于肿瘤相关巨噬细胞（TAM）中。在脑胶质瘤中，VSIG4的高表达与不良预后相关。

VSIG4与其配体的相互作用可以强烈抑制T细胞反应^[1]，是一个有潜力的巨噬细胞特异性的免疫检查点，可与目前的基于T细胞的疗法（如PD-(L)1抗体）形成互补。目前尚未鉴定出T细胞表面的VSIG4配体。

VSIG4在肿瘤免疫中的作用^[2]

VSIG4与其配体的相互作用还可以减弱NLRP3炎性小体的活化，及阻碍线粒体丙酮酸代谢来削弱巨噬细胞的M1（炎性）极化。抗VSIG4抗体可促进M2型（抑制性）巨噬细胞重编程为M1型；下调CD14、CSF-1、CD163等M2标志物，并上调CD86、CD40等M1型巨噬细胞标志物^[3]。肿瘤微环境的免疫抑制性常常是免疫检查点抑制剂（ICI）耐药的主要原因，而VSIG4抗体可重塑肿瘤微环境。2020年12月14日，三生制药/三生国健选取Verseau的VSIG4单抗作为授权产品。

PSGL-1（P-selectin glycoprotein ligand-1）在大部分造血干来源的细胞上都有表达，尤其在M2型巨噬细胞及TAM中高表达^[4]。PSGL-1的配体包括VISTA和选择素类（selectin-E, selectin-P, selectin-L）。Verseau研发的抗PSGL-1抗体VTX-0811可以将M2巨噬细胞重新极化为促炎的M1型，而不影响VISTA和选择素介导的正常功能^[5]。2019年11月18日，三生制药与Verseau达成授权协议，其旗下子公司三生国健将负责VTX-0811（SSGJ-617）在大中华区的开发和商业化。2022年1月4日，VTX-0811获得美国FDA批准开展临床试验，用于治疗实体瘤；同年3月22日SSGJ-617获得CDE批准开展临床试验，其也是国内首款PSGL-1靶向拮抗型抗体。

除去Verseau研发VSIG4和PSGL-1抗体外，Sensei Biotherapeutics公司正在研发SNS-101：条件性（低pH环境下）阻断PSGL-1配体VISTA的抗体；以及SNS-102，条件性结合VSIG-4的单抗，以治疗肿瘤。

为助力靶向VSIG4和PSGL-1的新药研发，百奥赛图成功开发了相应靶点人源化小鼠。

 

B-hVSIG4 mice

品系名称：C57BL/6N-Vsig4^tm3(VSIG4)/Bcgen

货号：111035

 

蛋白表达分析

品系特异性的人/鼠VSIG4表达。收集野生型C57BL/6小鼠（+/+）和纯合B-hVSIG4 mice (H/H)的腹水巨噬细胞，并做流式分析。结果表明，小鼠VSIG4仅在野生型小鼠中表达，人VSIG4仅在纯合B-hVSIG4 mice (H/H)中表达。

 

体内药效评估

抗人VSIG4抗体（(hVSIG4 Ab-A，内部合成）在B-hVSIG4小鼠中的抗肿瘤活性。A) 抗人VSIG4抗体抑制B-hVSIG4小鼠中MC38肿瘤生长。小鼠结肠癌细胞系MC38皮下植入B-hVSIG4小鼠（雌性，7周龄，n=5）中。当肿瘤生长至100-150mm3的时候分组并进行抗人VSIG4抗体治疗。B）治疗过程中小鼠的体重变化。结果显示，抗人VSIG4抗体可有效控制B-hVSIG4小鼠中的肿瘤生长，表明B-hVSIG4小鼠是对抗人VSIG4抗体进行体内药效评估的有力模型。数值=平均值±SEM。

 

肿瘤浸润淋巴细胞分析。实验结束后收集小鼠肿瘤细胞（n=5），并用流式细胞仪分析治疗后各类淋巴细胞的比例。相对于同型对照抗体（isotype），治疗组的CD8+ T细胞、CD4+ T细胞、Tregs、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞及M1/M2比例均有提高，而MDSCs及M2型巨噬细胞比例有所下降。数值=平均值±SEM。

 

B-hPSGL-1 mice

品系名称：C57BL/6N-Selplg^tm1(SELPLG)/Bcgen

货号：111470

 

蛋白表达分析

品系特异性的人/鼠PSGL-1表达。收集野生型C57BL/6小鼠（+/+）和纯合B-hPSGL-1 mice (H/H)的脾细胞，并做流式分析。结果表明，小鼠PSGL-1仅在野生型小鼠中表达，人PSGL-1仅在纯合B-hPSGL-1 (H/H)小鼠中表达。

 

巨噬细胞相关靶点人源化小鼠列表

参考资料

1. Vogt, Lorenz et al. “VSIG4, a B7 family-related protein, is a negative regulator of T cell activation.” The Journal of clinical investigation vol. 116,10 (2006): 2817-26. doi:10.1172/JCI25673

2. Zhou X, Khan S, Huang D and Li L (2022) V-Set and immunoglobulin domain containing (VSIG) proteins as emerging immune checkpoint targets for cancer immunotherapy. Front. Immunol. 13:938470. doi: 10.3389/fimmu.2022.938470

3. Kwon BS, Kim HJ, Lee JW466 Combination therapy with anti-VSIG4 and anti-PD-L1 suppress growth of tumor via conditioning of tumor microenvironmentJournal for ImmunoTherapy of Cancer 2022;10:doi: 10.1136/jitc-2022-SITC2022.0466

4. Mantovani, A., Allavena, P., Marchesi, F. et al. Macrophages as tools and targets in cancer therapy. Nat Rev Drug Discov 21, 799–820 (2022). https://doi.org/10.1038/s41573-022-00520-5

5. PSGL-1 is a novel macrophage checkpoint in immuno-oncology. DOI: 10.1200/JCO.2020.38.15_suppl.e15090 Journal of Clinical Oncology 38, no. 15_suppl 2020 ASCO