亚硫酸氢盐处理后测序（bisulfite sequencing PCR,BSP）法是检测基因甲基化的经典方法，其原理为：用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶（C）被转化为尿嘧啶（U）而甲基化的胞嘧啶则不变。

基因组DNA经亚硫酸盐处理后，设计BSP引物扩增目的片段，此时尿嘧啶（U）全部转化为胸腺嘧啶（T），最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。

技术优势

·   检测序列长，可长达200-400bp

·   分辨率高，可检测到每一个碱基的甲基化状况

·   对于样品要求低，适用于新鲜、冷冻和FFPE样本

服务内容

1. 基因组DNA的Bisulfite转化；

2. BSP（Bisulfite Sequencing PCR）法，包括引物设计与合成，TA克隆测序及数据分析。

样品要求

·   若提供基因组DNA，需≥2μg

·   若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料，请提供足够提取2μg以上基因DNA的材料量

·   基于所选择的DNA甲基化检测方法，请提供相应的引物或引物序列

BSP服务完成时提供

·   Bisulfite处理的基因组DNA

·   实验报告(包括BSP产物的直接测序报告)

·   5个有效的阳性克隆

·   空点图

结果展示

BSP测序图

BSP点状图和BSP序列比对

BSP柱状图