产品用途及原理：Bradford法是一种迅速、可靠的通过染色测定溶液中蛋白浓度的方法。且Bradford法检测蛋白浓度不受绝大多数样品中化学物质的影响。Bradford法原理是基于考马斯亮蓝G250能与蛋白质快速结合，考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm，其与蛋白质结合后在595nm处有最大吸收值。并且光吸收值与蛋白质含量成正比，故而可用于蛋白质含量检测。

Bradford法蛋白定量检测试剂盒具有操作便捷，速度快，灵敏度高等特点。可检测蛋白浓度范围为25-1000ug/ml。

产品包装规格：

运输与储存：

常温运输，蛋白标准品（BSA）4℃保存，有效期12个月。配置成蛋白标准溶液后需要-20℃保存，并在6个月之内使用。

操作步骤：

1.   配置蛋白标准储备液：取1ml蛋白标准配制液到蛋白标准品（BSA）管中，将25mg蛋白标准品完全溶解，即得到浓度为25mg/ml的蛋白标准贮存液。此溶液可-20℃长期保存。

2.      蛋白标准工作液：取两只离心管，分别标注为1，2。分别加入900ulPBS稀释液，然后取蛋白标准储备液100ul加入至1中混匀，从1中取100ul加入至2中混匀。2即为蛋白标准工作液，浓度为0.25mg/ml。

3.      绘制标准曲线：将蛋白标准工作液分别按0、1、2、4、8、16、20ul加入到96孔板中，然后用PBS稀释液将每孔补足为20ul。得到蛋白浓度依次为0、12.5、25、50、100、200、250ug/ml。

4.      将待测的蛋白样品进行适当稀释（使用PBS稀释液进行稀释），然后每个样本取20ul加入96孔板中。

5.      检测：向以上每孔加200ul考马斯亮蓝G250溶液充分混匀，放置于室温反应3-5min，以标准曲线0作参照，在595nm波长下比色测定，记录各孔吸光值。

6.      计算：以标准曲线样品浓度与吸光值绘制标准曲线，根据所测样品的吸光值代入标准曲线公式中计算出待测样品浓度。

注意事项：

考马斯亮蓝G250使用前需恢复至室温，摇一摇瓶身。避免影响检测灵敏度。

蛋白标准品请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的标准。

温馨提示：使用前请详细阅读使用说明书，在有效期内使用，并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。

生产企业名称：武汉博尔夫生物科技有限公司

地址：湖北省鄂州市葛店镇东湖高新智慧城25栋301室