原理

DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞后，被水解生成DCFH。而DCFH不能透过细胞膜。细胞内的ROS可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。DCF被488nm激发光激发后，发射530nm的荧光信号，被FITC通道接收，检测DCF的荧光就可以判定细胞内活性氧ROS的水平。

实验流程

收集细胞→PBS清洗→JC-1工作液孵育→荧光显微镜观察或流式细胞仪分析

应用：

• ROS可对细胞膜结构、核酸和蛋白分子产生氧化作用，引起其结构和功能障碍。
  2、ROS增多会导致机体产生氧化应激反应(Oxidative Stress)造成细胞损伤
  3、ROS参与多种病理机制，百种以上的疾病状态都可能有ROS的参与。
  4、检测细胞ROS的含量，可以了解ROS在细胞一些生理和病理状态中的变化，分析药物效应和相关机制