抗体标记与改造
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- 2023-08-16 17:53:45
武汉纳博生命科技有限公司
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纳米抗体可以基于BRET方法,实时检测受体活性状态。根据相关文章记载,构建相对应的功能质粒,并做检测,得到的结果和文章中一致,基于BRET技术,纳米抗体可以实时检测受体的活性状态。
同时,根据相关报道,NB80可以识别β2AR的激活状态,也构建BRET assay功能质粒,做检测,发现NB80也可以比较好的检测β2AR的活性状态,这说明在一般状态下,能特异性识别GPCR激活/非激活状态的纳米抗体,可以设计成BRET assay,来实时检测受体的活性状态。并且由于此纳米抗体只能识别该种受体,不会受到其他受体活性的影响,在受体异源二聚化等功能检测中有独特的优势。
纳米抗体同时也可以通过标记荧光分子,比如AF488/AF647等,用于细胞成像。
mGluR2纳米抗体DN1标记AF647,用于细胞成像:
mGluR5纳米抗体NB43标记AF488或者AF647,可供不同的实验要求的选择:
由于有些标记分子比较大,存在空间位阻等因素,标记之后会很大程度上影响抗体的亲和力。为了解决这个问题,可以再纳米抗体上加上FC片段,来改造纳米抗体,并且FC可根据实验需求选择human-FC、mouse-FC、rabbit-FC等,来满足不同实验需求。
总的来说,可通过荧光分子标记、融合荧光蛋白、融合酶分子、多个纳米抗体单体串联等等方法,来标记和改造纳米抗体,从而使纳米抗体发挥多种多样的功能,来满足不同实验的需求。