

T7 RNA聚合酶
- HCKE-T7001
- 海澳斯凯尔
- 江苏省苏州市
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- 2023-07-11 13:51:53
苏州市海澳斯凯尔生物科技有限公司
- 英文名称
- T7 RNA Polymerase
- 别名
- T7 聚合酶
- 关键词
- RNA聚合酶聚合酶T7
【适用范围】
T7 RNA聚合酶是一种来源于T7噬箇体的RNA聚合酶,对T7噬箇体启动子具有极高特异性。T7 RNA聚合酶是一种DNA 依赖性的RNA 聚合酶,能够在体外以单链或双链DNA为模板,从启动子开始催化模板DNA下游5'→3' RNA 合成,具有极高的转录效率。
【产品组分】
组分 |
体积 |
T7 RNA聚合酶(1mg/mL) |
20 μL |
5×Transcription Buffer |
50 μL |
1×Transcription Buffer: 40 mM Tris-HCl, pH 7.8, 20 mM NaCl2, 6 mM MgCl2, 2 mM spermidine-HCl, 10 mM DTT
【储存条件及效期】
于-20 ℃保存,有效期为24 个月。
【热失活】
70℃,10min
【反应体系及条件】
组分 |
体积 |
5×Transcription Buffer |
10μL |
ATP/GTP/CTP/UTP(25 mM each) |
4μL |
T7 RNA Polymerase(1 mg/ mL) |
5μL |
RNase Inhibitor(40 U/μl) |
1μL |
DNA 模板 |
1μg |
DEPC-treated Water |
Up to 50 μL |
a. 37度孵育2小时
b. 如需去除DNA模板,加入2μL DNase I(1U/μl)终止反应
c. 终止反应:加入2 μL 0.2 M EDTA(pH8.0)或者 70°C反应10 min。
【注意事项】
1. 转录反应体系的配制应在无 RNase 污染的环境中完成,操作过程建议佩戴手套以及口罩,使用高压灭菌的水及枪头。
2. 该酶活性极强,对模板DNA纯度要求不高,PCR产物经乙醇沉淀后可直接用于转录。