PEGeasy病毒浓缩试剂盒
- GE-19002-50
- 东岭生物
- 江苏省苏州市
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- 2023-01-03 14:56:36
江苏博美达生命科学有限公司
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产品介绍：
通过病毒包装生产出的病毒滴度通常较低，且含有较多杂质，通常无法满足后续储存和使用的需要，因此需要对病毒进行浓缩纯化。
PEGeasy病毒浓缩试剂（GE-19002-50）可简单、快速、高效地浓缩细胞培养上清中的重组慢病毒及逆转录病毒，无需超速离心。50ml浓缩试剂可将200ml病毒上清浓缩至2ml或更小体积，满足实验室小规模病毒浓缩需要。
产品信息：
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产品名称
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内容
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规格
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储存条件
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PEGeasy病毒浓缩试剂
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5XPEG病毒浓缩试剂
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50ml
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4oC
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其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂和组分：
基础培养基
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
按相关步骤包装生产慢病毒；
提前预冷离心机至4℃；收集病毒上清，2200g，4℃离心10min；
收集病毒上清至新离心管，加入病毒上清1/4体积的5XPEG Solution；
注：病毒上清在加入PEG Solution前推荐使用0.45μm滤器过滤。
轻轻上下颠倒1min混匀，4℃静置至少4h（推荐静置过夜）；
提前预冷离心机至4℃；1600g，4℃离心1h；离心后管底可见白色沉淀；
注：逆转录病毒1400g，4℃离心45min。
小心去除上清，1400g，4℃离心1min去除残余上清；
重复第6步骤一次，以完全去除PEG上清；
沉淀用预冷的DMEM无血清培养基轻轻重悬，4℃静置3h（也可静置过夜以充分溶解沉淀）；重悬体积根据浓缩倍数确定，推荐10-100倍浓缩；
轻轻重悬沉淀，通过12000g，4℃离心10min去除不溶物，分装，-80℃冻存备用。
注：重悬过程中应尽量避免气泡产生。
常见问题及提示：
病毒对温度较为敏感，所用试剂、耗材尽量预冷后使用；
所有操作应避免气泡产生，减少对病毒的机械损伤；
离心后沉淀大小并不代表病毒量，沉淀过多可能是病毒上清中杂质或血清含量过高导致，推荐使用0.45μm滤器过滤或降低血清浓度；
操作步骤9中，若通过离心去除不溶物，可能导致病毒损失过多；建议操作步骤8中病毒重悬后，于4℃静置过夜以充分溶解病毒；
冻融对病毒活性具有较大影响，应避免反复冻融。
