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免疫印迹WB(核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白)
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  • 上海睿远生物
  • 上海市
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  • 2022-05-05 17:35:34

上海睿远生物医药科技有限公司

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服务介绍:

  蛋白质免疫印迹法 (Western Blot ) ,简称WB ,是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白质分离开,然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上,利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP标记的二抗结合一抗,再加以ECL发光液显色,检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析,还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。

 实验结果:

免疫印迹WB(核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白)(图1)

免疫印迹WB(核蛋白、线粒体蛋白、膜蛋白)(图2) 

 

实验流程:

  蛋白提取-制胶-电泳-转膜-封闭-一抗孵育-二抗孵育-化学发光-结果分析;

送样运输要求:

  

实验项目

标本类型

样本要求

运输条件

WB检测

(检测某种蛋白的有无及含量差异)

组织(无论是动物组织还是植物组织都不要用锡箔纸或自封袋包裹,请选择EP管或标本管装)

1、 组织取样时洗净血污,液氮或干冰速冻-80℃保存,保存时间3个月内为宜,时间过长蛋白可能降解。

2、标本量100mg(黄豆大小)以上。骨头、脂肪蛋白含量较少组织需提供200-300mg。

干冰运输

细胞

1.活细胞汇合度70%-80%,装满新鲜培养基,不透气培养瓶,封口膜封口常温运输;

常温运输

2.细胞沉淀;

干冰运输

3.细胞上清,干冰运输。

干冰运输

蛋白

加loading buffer变性。

干冰运输

血液

1、新鲜抗凝血,避免剧烈震荡,避免凝血;

4℃运输

2、分离白细胞沉淀或提取白细胞蛋白。

干冰运输

非常规样本

菌液、材料蛋白、外泌体、精液、卵母细胞等保证蛋白含量充足。

干冰运输

其他特殊要求

如客户提供试剂盒,要求提取特殊蛋白,需要提前和实验室沟通,并且准备好实验样本,保证样本量充足。

按试剂盒要求运输

 

 

 

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