Safe Harbor 基因敲入试剂盒及敲入克隆
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- 2023-05-04 16:08:29
广州易锦生物技术有限公司
订购敲入试剂盒及克隆
优势
安全整合
靶向 safe harbor 位点的基因敲入能保证转入基因的正常转录，且无已知的副作用。
特异靶向
特异靶向 safe harbor 位点的 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介导 DNA 双链断裂，诱发同源重组，促使转入基因整合进 safe harbor 位点。
生理学水平表达
靶向 safe harbor 位点的基因敲入能保证外源基因以低拷贝数的形式整合到目标基因组，确保转入基因的表达接近生理学水平，从而简化了表型解读。
ORF敲入亲和性
人类及小鼠各有超过20,000条经过序列验证的 ORF 可用于转入基因的供体克隆设计。
人类 AAVS1 及小鼠 ROSA26 ORF 敲入克隆
| 货号 | 产品 | 描述 |
| 多种 | 人类 AAVS1 及小鼠 ROSA26 ORF 敲入克隆 | 由 CMV 启动子启动 ORF 表达。能将 ORF 或您的目的基因敲入人类 AAVS1 或小鼠 ROSA26 safe harbor 位点。 |
safe harbor技术介绍
通过在染色体上的特定位点插入目的基因和其他遗传因子，对基因组进行改造——这项实验在细胞工程上具有极大的价值。经过基因改造的细胞在医学研究、基因功能研究及族系跟踪和分析中扮演着重要的角色。而所有这些应用都取决于转入基因功能的可靠性和可预测性，同时需要转入基因不扰乱内源基因和/或其他调控因子的功能。相反，随机整合的转入基因会带来不可预知的插入或突变，构成威胁。
今年发展的新实验方法是将基因转入基因组上一个已知的安全位点。人类第19号染色体上的 AAVS1（又名为 PPP1R2C 位点）或者小鼠基因组上的 ROSA26 就是这种经过验证的“安全港”位点。它们具有开放的染色质结构，能保证转入基因片段的功能。最重要的是，在这些位点插入外源基因片段对细胞无已知的副作用。
特异靶向 safe harbor 位点的 TALEN 或 CRISPR-Cas9 能在基因组的 safe harbor 位点上生成 DNA 双链断裂（DSB），诱发 DNA 的自然修复机制，促使该位点与对应的 ORF 敲入克隆之间发生同源重组（HR）（图1），将 ORF 敲入克隆上的 DNA 片段整合到基因组的 safe harbor 位点。
图1. 基因组编辑工具介导的 safe harbor 基因敲入原理图
