扫描电镜
即扫描电子显微镜（SEM），利用极狭窄的电子束去扫描样品，进而通过电子束与样品的相互作用产生各种效应，原理即为利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态，常用于物质表面及断面立体结构的观察。

透射电镜
Transmission Electron Microscope,简称TEM ,透射电镜可以观察样品的内部精细结构，这些结构即亚显微结构或者超微结构。透射电镜使用的是透射电子,并收集透过样品的电子,从而提供了样品的内部结构的信息,如晶体结构、形态以及应力状态的信息。目前*先进的TEM其空间分辨率达到了pm级别。由于透射电子的要求, TEM的样品必须制备成超薄切片,通常为50-100 nm ,样品制备比较繁琐,常用的方法有超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。

 
透射电镜实验步骤
透射电镜生物样品的制备:
①取小于1立方毫米的组织;
②用2.5%*二醛(磷酸缓冲液配制)固定2小时, 0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次x15 min;
③1 %锇酸固定液固定2小时，0.1M的磷酸缓)冲液漂洗3次*15 min ;
④梯度Z醇进行脱水，4°C进行;
⑤包埋:使用纯*酮+包埋液(2:1 )室温处理4小时,纯*酮+包埋液( 1:2 )室温过夜,纯包埋液37°C处理3小时;
⑥固化: 37度烘箱过夜, 45度烘箱12小时, 60度烘箱24小时;
⑦超薄切片机切片,厚度在50 nm左右;
⑧3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色;
⑨透射电镜观察，拍片。

扫描电镜实验步骤
1.将细胞铺片放入PBS中清洗细胞表面;
2.将细胞铺放入片青霉素小瓶中加入4°C预冷的2.5%*二醛4°C固定过夜;
3.吸出2.5%*二醛,加入PBS中清洗3次,每次10min;
4.吸出PBS ,加入4°C预冷的1 %6锇酸4°C固定2h ;
5.吸出1%锇酸,加入PBS中清洗3次。每次10min ;
6.吸出PBS,按30%、50%、70%、 80%、 90%、 95%、 100% 顺序加入酒精，每种浓度酒精通过2次。每次15min,进行系列酒精脱水;
7.吸出酒精,加入520%的乙睛溶液,然后依次加入70%、80%、 90%、 95%、 100% 的乙睛溶液。每个浓度浸泡15min。将装有细胞铺片的青雷素小瓶放到真空镀膜台的真空装置内30-50min ,抽低真空。待其温度升至室温后放气,取出样品;
8.将装有细胞铺片的青毒素小瓶放入真空喷镀仪中,先喷碳,后喷金,喷镀应均匀;
9.扫描电镜观察。

结果展示：


实验完成周期及交付标准：
1.实验周期: 3周
2.交付标准：电镜图片、病理报告、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)


需确认的信息（客户提供）：
1.样本的种属.
2.样本类型,是组织还是细胞
3.样本数量
4.透射电镜分析要求、拍照要求或是参考文献