miArrest™ miRNA抑制剂
- MIC-HG-AM03
- 易锦生物
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- 2023-05-04 14:37:47
广州易锦生物技术有限公司
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产品介绍
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miRNA抑制剂可以特异、高效地抑制生物体内源性miRNA的活性，是研究miRNA功能缺失的重要工具。GeneCopoeia提供慢病毒或非病毒载体的miArrest™ miRNA抑制剂表达克隆和化学合成的miRNA抑制剂。 |
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miArrest™ miRNA抑制剂克隆可以特异性地结合目的miRNA，瞬时和稳定地抑制miRNA的功能，采用H1或者U6启动子驱动转录可以保证在大多数哺乳动物细胞中高水平表达。 |
优势
覆盖面广
- 针对所有已知的人、小鼠和大鼠miRNA
灵活的载体选择
- 慢病毒载体可转导普通细胞和难转染、未分化细胞
- 非病毒载体可进行稳定或瞬时转导
先进可靠的设计
- 表达框经过专利算法设计并经过严格的实验验证
抑制性能优越
- 与其他化学合成的miRNA抑制剂相比具有更强、更持久的抑制作用和极低的细胞毒性(参照表1）
- 采用H1或U6启动子保证在大多数哺乳动物细胞中高水平表达
高通量兼容
- 快速简便的实验设计
- 可同时检测多个样
图1. 不同剂量miArrest™ miRNA抑制剂克隆对靶miRNA抑制作用的对比
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HEK293细胞中共转染miR-125a 抑制剂表达质粒 (GeneCopoeia HmiR-AN0094-AM01) 、miR-125a 前体表达质粒(GeneCopoeia HmiR0309-MR03) 和miR-125a的靶标克隆质粒(GeneCopoeia HmiT019205-MT02：将LIN28 的3’UTR克隆到Gaussia荧光素酶-碱性磷酸酶双报告载体)。转染24小时后检测报告基因Gaussia 荧光素酶和参照基因碱性磷酸酶的活性。只转染Gluc-LIN28-3’-UTR质粒的细胞中Gaussia 荧光素酶与碱性磷酸酶活性比值设为1 (左数第一条柱)，用来标准化其他细胞样品中的报告基因活性。结果表明miR-125a抑制了Gluc-LIN28-3’-UTR中Gluc 70%以上的活性（左数第二条柱）。这种抑制效应可被导入的不同剂量的miR-125a抑制剂表达质粒特异性的阻遏。转染100 ng 抑制剂表达质粒时，细胞内报告基因/参照基因活性比值（右数第一条）已超出单独转染Gluc-LIN28-3’-UTR报告质粒的对照组。这说明miR-125a抑制剂可以阻遏外源和内源性的miR-125a对靶标基因的抑制，提高GLuc-LIN28-3’-UTR转录本的翻译水平。
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| 基于克隆载体的抑制剂 | 2'-甲氧修饰的抑制剂 | 化学合成的LNA抑制剂 | |
| 抑制效力 | +++++ | ++ | ++ |
| 特异性 | +++++ | +++ | +++ |
| 稳定性 | +++++ | + | +++ |
| 持久性 | Long term | Transient | Transient |
| 细胞毒性 | – | – | + |
| 导入细胞难易程度 | +++++ | – | – |
表1. 基于克隆表达载体的和化学合成的miRNA抑制剂的比较
图2. miRNA抑制剂表达克隆的作用机理
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miRNA 抑制剂克隆导入细胞后表达的miRNA抑制剂(miArrest)特异地结合它们的靶miRNA。miRNA抑制剂转录后折叠形成一个稳定的陷阱结构，可以结合两分子靶miRNA。 miArrest™高效、特异地结合细胞内成熟的靶miRNA，阻止了miRNA对靶标mRNA的降解或者翻译抑制，上调miRNA靶标基因的表达。 独特的载体设计确保最大的特异性、抑制强度、抑制作用持久度和最低的脱靶效应。 |
载体
miRNA抑制剂表达克隆载体
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载体
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报告基因
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筛选标记
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启动子
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载体类型
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pEZX-AM01
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mCherry
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Puromycin
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H1
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Mammalian
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pEZX-AM02
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mCherry
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Puromycin
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U6
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Mammalian
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pEZX-AM03
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mCherry
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Hygromycin
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H1
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HIV
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pEZX-AM04
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mCherry
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Hygromycin
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U6
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HIV
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克隆套装
miRNA抑制剂表达克隆套装
GeneCopoeia除了提供单个克隆，也提供预制和定制的miRNA抑制剂表达克隆套装。
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货号
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产品描述
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miRNA
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载体
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价格
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MIC-HG-AM03
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Human whole genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral)
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994
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pEZX-AM03
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Inquire
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Various
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Human cancer miRNA inhibitor clone sets (lentiviral)
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Various
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pEZX-AM03
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Inquire
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MIC-MG-AM03
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Mouse genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral)
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307
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pEZX-AM03
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MIC-RG-AM03
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Rat genome miRNA inhibitor clone set (lentiviral)
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222
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pEZX-AM03
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