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髓过氧化物酶(MPO)测试盒(比色法)
  • BPC012
  • bpro
  • 上海市
  • 一周内
  • 100T盒
  • 220
  • 2022-08-15 14:49:58

上海朗顿生物科技有限公司

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1.原理

中性白细胞中存在有髓过氧化物酶 ,每个细胞中所含的酶的量是一定的,约占细胞干重的5%,该酶具有使过氧化氢还原的能力,利用这一特点可以分析酶的活力,并定量测定中性白细胞的数目。其原理如下:

   MPO+H2O2→复合物;复合物+AH2(供氢体) →H2O+MPO+A产物

通过供氢体邻联茴香胺供氢后生产黄色化合物,在460nm处通过比色测定A产物的生成量,从而推算出MPO的活力以及H2O2减少的量和白细胞的数目。

2.测定意义

髓过氧化物酶是中性粒细胞所特有,即使在有强吞噬作用的巨噬细胞中也极少或完全没有这种酶。在细胞化学上,一般将这种髓过氧化物酶作为中性粒细胞的标志。其功能为将氧化物和氧化氢转变为次氯酸盐。在炎症状态下,它被释入细胞外液,进入循环。此酶参与含LDL的脂类氧化。

3.测试所需仪器设备及自备试剂

可见光分光光度计,恒温水浴锅,离心机, 漩涡混匀器,精密移液器,试管。

4.适用范围

本试剂盒可测定动物血清、血浆、组织以及培养细胞、培养上清液、脑积液等样本中的MP0的活力。

5.试剂及配置

试剂

50T/25样

100T/50样

试剂1

5ml*1瓶,试剂1贮存缓冲液,用时稀释10倍为应用缓冲液

10ml*1瓶,试剂1贮存缓冲液,用时稀释10倍为应用缓冲液

试剂2

250mg*1支,溶于稀释后的试剂1,用时每支加 应用缓冲液30ml溶解,可以37℃加热促进溶解,4℃保存2周

500mg*1支,溶于稀释后的试剂1,用时每支加 应用缓冲液60ml溶解,可以37℃加热促进溶解,4℃保存2周

试剂3

15ml*1瓶,用时稀释10倍为试剂3应用液

30ml*1瓶,用时稀释10倍为试剂3应用液

试剂4

25mg*1支

25mg*2支

试剂5

0.1ml*1支

0.1 ml l*2

显色剂的配置:

a. 50T/25样:150ml试剂3应用液+试剂4一支+试剂5一支

b. 100T/50样:300ml试剂3应用液+试剂4两支+试剂5两支

6. 操作步骤

(1)血清(浆)样本:取血清(浆)与试剂二按1:1比例稀释,充分混匀。

 

测定孔

蒸馏水

 

样本

0.2

显色剂

3

混匀,在460nm处,1cm光径,双蒸水调零,测定各管OD值,记为A0,然后37℃孵育10分钟,再次测定各管吸光值A10

(2)组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的试剂2,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,3000转/分离心15分钟,取上清加样。

 

测定孔

蒸馏水(ml)

 

样本(ml)

0.2

显色剂(ml)

3

无标题.jpg

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