MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(500次)
产品货号：20311

产品规格：500次

产品简介：
　 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。从而避免了由于去除培养液时Formazan被部分去除而引起的误差。
 本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。
本试剂盒可以测定500个样品。

包装清单:
产品名称 包装 储存条件
MTT溶液 10ml 4℃/长期保存-20℃、避光
Formazan溶解液 55ml 4℃、避光

操作步骤：
1.通常细胞增殖实验每孔加入100μl 2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100μl 5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要，进行培养并给予0-10μl特定的药物刺激。
2.每孔加入20μl MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育4小时。
3.每孔加入100μl Formanzan溶解液，在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会长一些，建议室温或37℃过夜孵育。
4.在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片。

注意事项 ：
1.由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2.MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3.Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。混匀过程请用移液枪轻轻吹匀，勿上下颠倒，避免气泡。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。