内毒素去除剂
产品货号：T16389
产品规格：20ml/100ml
产品简介:
本公司生产的内毒素清除剂主要用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的pH值、盐浓
度和温度条件下，内毒素清除剂能与DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合，经过室温高速离心后，
DNA或蛋白质等保留在水相，而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过3次以上重复抽提后可将活
性为5000～50000 EU/ml的内毒素水平降低到5～0.5 EU/ml以下，即降低1000～10000倍。
产品组成：
试剂名称 规格 保存条件
内毒素去除剂 20ml/100ml 2-8℃
操作步骤：
1. 提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴 5min，期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。
a)已纯化的质粒 DNA 内毒素清除：吸取 500μl DNA 溶液于微型离心管，加入 1/10 体积 3M NaAc pH5.或 1/20
体积 5M NaCl 溶液，冰浴 5min。
b)在提取质粒 DNA 过程中清除内毒素：以碱裂解法提取质粒为例，在加入裂解液和中和液并离心去除碎片
之后，吸取含质粒 DNA 的上清于新离心管中，冰浴 5min。
2. 加入 1/5 体积预冷的内毒素清除剂，振荡混匀，溶液变浑浊。
3. 冰浴 5min，溶液应变清亮。
4. 37℃水浴 5min，不时振荡，溶液又变浑浊。
5. 12000rpm 室温离心 5min，溶液应分为两相，上层水相含 DNA，下层油状相含内毒素。
6. 将含 DNA 的上层水相转移到新管，弃油状相，重复抽提三次，即重复步骤 2-6 三次。
7. 加入 2.5 体积无水乙醇，-20℃沉淀 30min 或过夜；12000rpm 离心 10min，弃上清；加入 70％乙醇洗涤沉淀，
12000rpm 离心 5min 弃上清；空气干燥沉淀，加入 100～200μl 无内毒素的高纯水或 TE 溶解沉淀。
8. 用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性，并与初始样品比较。
注意事项:
1. DNA 浓度>1mg/ml 时清除内毒素效率降低。由于 DNA 和蛋白质本身的性质，清除程序可导致 10-20％的 DNA
丢失，所幸的是与清除内毒素的艰难相比 DNA 更容易提取制备。
2. 所有溶液应用无内毒素的高纯水配制，所有器械材料均应不含内毒素，玻璃器皿可高温烘烤，非挥发性水溶
液可高压 120℃高温处理。
有效期：
4℃半年有效，-20℃长期储存。