细胞名称

PT67 逆转录酶病毒包装细胞

货号

U30034

种属

小鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁

培养条件

培养基：90%DMEM(H)+10%FBS ,推荐使用UBI的特级胎牛血清（U11-059A）

温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳

保存

冻存条件：90%完全培养基+10%DMSO

(备注：建议使用UBI的Cell Freezing Medium无血清冻存液（U80-025C），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

传 代

1. 用 75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行 1-3 小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入 5-6mL 新鲜 培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换 液以及传代；

2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%，需要对其进行传代，第一次传代比例为 1:2；

3. 传代步骤：将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养 瓶中加入 3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1-2 ml 预热好的胰酶，置于 37° 孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变 圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化）， 消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完 全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm 离心 3min，弃上清，加入完全培养基重悬细 胞，进行传代。

供应限制

仅供科研使用

常见问题及解决方案

1. 培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老 师解决。

2. 收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用 原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时 间最长不宜超过 72 小时）

3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察， 如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 8-10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将 细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我 们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。