服务简介：

焦磷酸测序（Pyrosequencing）技术是由4种酶（DNA 聚合酶(DNA polymerase)、ATP硫酸化酶(ATP sulfurytase)、荧光素酶(luciferase)和三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)）催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应。

n 全套试剂均用qiagen，保证质量稳定

n 定量分析癌症相关基因的突变

n 定量分析单个和多个CPG位点

n 确定特定区域的CPG 甲基化状况

n 序列背景提供内置的分析参照

n 后续分析简洁灵活

基本流程：

n DNA亚硫酸盐处理

n 产物回收

n PCR扩增（1条修饰引物+1条普通扩增引物）

n 焦磷酸测序（1条普通测序引物）

n 后续数据分析

客户提供：

1、目的序列

n 提供原始序列并标记出目的序列

n 重点区域请加粗、CG位点请加双下划线

n 请告知每段序列在费用上可承受几个反应（比如这段序列很长，但经费预算只能做一个反应，我们就会把这个反应尽可能的集中在重要的部分）

n 只有评估结果出来，才知道适合用50bp还是100bp的机器或者混合搭配。

n 由于引物不能含有CG位点（CG位点的甲基化会影响扩增效率），所以引物设计的位置是有限制的，不是每个地方都能设计引物。

2、样品要求

n DNA或者血液、组织等 （DNA浓度达到30ng/ul，纯度为1.8左右，量达到30ul，具体还得看反应个数）

n 客户如提供亚硫酸盐处理过的DNA，本实验室不对样品是否处理彻底负责，仅对后续实验流程负责。

最终交付：

1、结题报告

2、原始数据