羟基磷灰石
- GC01.01，GC01.02
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- 2023-04-24 17:52:12
上海贝融生物基因工程有限公司
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羟基磷灰石
BETAGENE CERAMIC HYDROXYAPATITE
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说明
羟基磷灰石，又称羟磷灰石，碱式磷酸钙，是钙磷灰石(Ca5(PO4)3(OH))的自然矿物化。但是经常被写成Ca10(PO4)6(OH)2的形式，以突出它是由两部分组成的–羟基与磷灰石。OH-羟基能被氟化物、氯化物和碳酸根离子代替，生成氟基磷灰石或氯基磷灰石，晶体状羟基磷灰石已经被广泛用于生物活性物的分析、制备及工业化生产。
由于晶体状羟基磷灰石的晶体结构强度的原因限制了其在工业化生产的流速和规模。20世纪80年代，科学家通过高温灼烧的手段得到更加坚固，多孔的羟基磷灰石材料，这使得羟基磷灰石材料在规模化工业生产中能够承受更高的流速和压力，极大的提高了生产的效率。这种经过高温处理的羟基磷灰石材料就是我们俗称为陶瓷型羟基磷灰石。现在陶瓷型羟基磷灰石已经被广泛地应用于生物大分子的纯化制备，重金属离子的吸附去除以及骨修复材料中。
作用机制
羟基磷灰石包括两个结合位点：Ca2+和PO43-。这些结合位点按照其自有的晶体结构分布。PO43-离子与带正电的蛋白质以离子键结合，具有阳离子交换特性；其中的Ca2+离子与带负电蛋白质的自由羧基簇以金属螯合方式结合。
阳离子交换作用：当蛋白带正电荷时候，可以与PO43-结合，而与Ca2+是相互排斥，这种作用主要是阳离子交换作用。这种阳离子交换作用会受到洗脱缓冲液中的中性盐浓度（如NaCl）或者平衡液中磷酸盐浓度的影响。这种作用随着pH的增高也会相应减弱。因此，增加盐、磷酸盐的浓度或增高pH，都会减弱目的蛋白与PO43-之间的相互作用。
钙金属螯合作用：Ca2+可以与蛋白或其他分子（如核酸）表面的羧基簇或磷酸基团发生金属螯合作用，而同时与PO43-相排斥。这种结合方式作用力是一般离子交换的15-60倍。所以这种结合方式受离子的影响比较小，对NaCl不敏感。而且这种作用力随着离子强度会增加钙金属螯合力，原因是由于离子强度的增加屏蔽了分子表面功能基团与PO43-之间的相互排斥作用。这种结合方式可以通过磷酸钠进行洗脱。
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储存分类代码
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WGK
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闪电（F)
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10-Combustible liquids
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WGK 1
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Not Applicable
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闪电（C)
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个人防护装备
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Not Applicable
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Eye shields, gloves
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Specs:
Composition
Ceramic hydroxyapatite
Cat. No.
GC01.01，GC01.02
White Free Flowing Powder
Physical Appearance
Lysozyme binding assay
14 mg/g power
Particle size(mean)
20、40、80μm；Mean：43μm
Functional groups
Dynamic binding capacity
Type I：25 - 60 mg polyclonal lgG/mL CHT；Type II：15 - 25mg policlonal IgG/mL CHT
pH stability
6.5 - 14
Tapped density
0.63 g/ml
Regeneration
0.4 M sodium phosphate，pH 7-7.5；1 M trisodium phosphate，pH 11-12
At least 1 year in 1 N NaOH
Base stability
Autoclavability (bulk)
121°C，20 min in phosphate buffer，pH 7
Endotoxines
< 0.01 EU/kU
Typical linear flow rate range
Ca+，PO-，OH
FAQs:
BG-CHT的主要特点是什么?
BG-CHT是为生物大分子纯化开发的陶瓷型羟基磷灰石。运用拥有自主知识产权的制造工艺，采用精选的分析纯原料在受控的洁净条件下严格控制反应条件生产出来的陶瓷型羟基磷灰石具备优异的批次稳定性和纯化结合特征。我们生产的BG-CHT材料颗粒球形均匀，机械性能强，比表面积大，结合特异性好，供货稳定，可以较好的替代生产工艺中现有国内外的羟基磷灰石材料。
缓冲液如何配置？
常用的结合缓冲液是用 5mM 磷酸盐，pH 6.8。碱性蛋白可以用 pH 7.2，含 1M NaCl 磷酸盐缓冲液线性或阶段洗脱。酸性蛋白可以用 500mM 磷酸盐缓冲液线性或阶段洗脱。缓冲液 pH 要高于6.5。
如何延长填料的寿命？
在所有缓冲液中，包括贮藏液，都应包含 5Mm 磷酸盐，pH 大于等于6.5。对于所有应用尽量选用高pH 缓冲液。添加 ppm 级别的钙离子可以提高填料的坚固度。当第一次使用NaCl 洗脱时，由于氢离子的脱落，将会引起pH 降低，因此添加co-buffer，例如MES，可以提高填料坚固度。用 500mM 磷酸盐再生，去除吸附的蛋白，可以贮存在 0.1M NaOH 中。 如果NaOH 浓度低于 0.1M，请添加 5mM 磷酸盐。用NaOH 保存柱子阻止碳酸盐沉淀在柱子表面。避免突然地改变流速减少压力冲击。
装柱推荐的HETP和对称因子是多少？
当使用磷酸盐平衡，使用 2.5% 1M NaCl 作为测试样品，直径大于 5cm 的柱效，对于 40um，HETP 范围为 0.016-0.021cm，80umCHT， HETP 范围为 0.032-0.041cm。对称因子为 0.8-2.3 之间都可以接受。
50-1000 cm/hr
