抗体作为免疫系统的组成部分，在抵御疾病中发挥重要的作用。抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity，ADCC），是抗体发挥作用的方式之一，当IgG抗体通过Fab段与靶细胞（病毒感染的细胞及肿瘤细胞）表面抗原决定簇特异性结合后，其Fc段可与有FcγR的杀伤细胞（NK细胞、单核-巨噬细胞、中性粒细胞）等效应细胞结合，触发效应细胞的杀伤活性，直接杀伤靶细胞（病毒感染的细胞及肿瘤细胞）。

ADCC作用是抗体药物杀伤靶细胞的理想机制，通过ADCC试验可验证单克隆抗体的抗肿瘤活性。早期ADCC验证方法多为基于新鲜制备的外周血单核细胞或NK细胞做为效应细胞的杀伤试验，但这些方法存在细胞分类和培养困难、操作繁琐、背景值高、且受个体差异影响等缺陷。

爱康得生物致力于肿瘤抗体药物的研发，为解决传统ADCC试验中常见的问题，我们以荧光素酶报告基因检测系统为平台，构建了稳定转染CD16受体和NFAT(Nuclear Factor of Activated T-cells)反应原件的Jurkat-NFAT-Luc-CD16细胞系。当抗体的Fab段与靶细胞上抗原结合以后，抗体的Fc段与效应细胞Jurkat-NFAT-Luciferase-CD16细胞表面的（FcγRIIIA）结合，引起Jurkat-NFAT-Luciferase(New)-CD16细胞内NFAT相关信号通路活化，进而导致荧光素酶表达水平上升。该系统具有以下优势：

• 数据结果稳定，检测过程快速；

• 更高的灵敏度和优良的可重复性；

• 可应用于悬浮或贴壁的各种靶细胞；

• 可以用于质控治疗性抗体药物的效力和稳定性。

图示说明：当抗体的Fab段与靶细胞上抗原结合以后，抗体的Fc段与效应细胞Jurkat-NFAT-Luciferase(New)-CD16细胞膜表面CD16（FcγRIIIA）结合，引起CD16（FcγRIIIA）胞内信号域发生活化，激活Syk蛋白，Syk蛋白的活化导致内质网内Ca+外流，从而使得细胞质内Ca2+浓度上升，Ca2+与Calmodulin(钙调蛋白)结合以后，可进一步向下游传递信号，使得处于抑制状态的磷酸化NFAT去磷酸化，解除抑制状态，NFAT转移至细胞核内，导致NAFT相关的启动子基因活化，启动Luciferase基因表达。通过检测不同抗体浓度下，Luciferase表达水平，可以评估相关抗体的ADCC活性。ADCC效应的强弱，与抗体抗原亲和力强弱，抗体的Fc段类型及抗体浓度等，密切相关。

案例展示: 

服务与周期

• 准备靶细胞并与待测抗体孵育

• 准备效应细胞

• ADCC活性检测

• 周期1-2周

客户提供材料

• 抗体基本信息

• 靶细胞

交付内容

项目报告