流式核内染色试剂盒
- MD-20003
- 东岭生物
- 江苏省苏州市
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- 2022-12-26 14:14:27
江苏博美达生命科学有限公司
产品介绍:
DL- Nuclear Fix/Perm Kit主要应用于对转录因子、核蛋白、细胞因子和趋化因子进行核内染色,可固定细胞并透化细胞核核膜,进而对核内蛋白质进行染色。Nuclear-Perm/Wash Buffer经过反复优化,可最大程度地减少非特异性染色并最大化特异性荧光信号强度。
产品信息:
产品名称
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Cat log #
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规格
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储存条件
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流式核内染色试剂盒
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MD-20003
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1 kit
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4oC
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Fix/Perm Concentrate (2X)
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MD-20003-FP
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50ml
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Fix/Perm Diluent
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50ml
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N-Perm/Wash Buffer (10X)
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MD-20003-PW
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50ml
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试剂配制:
Fix/Perm工作液(1X):将1体积Fix/Perm Concentrate (2X)加入1体积的Fix/Perm Diluent,如将1ml Fix/Perm Concentrate (2X) 加入1ml的Fix/Perm Diluent,配制成2ml的Fix/Perm工作液,使用前新鲜配制。
N-Perm/Wash Buffer工作液(1X):将1体积N-Perm/Wash Buffer (10X)加入9体积的去离子水,如将1ml N-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去离子水,配制成10ml的1X N-Perm/Wash Buffer,1X N-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周内使用
使用说明:
请详细阅读使用说明后再开始相关实验。
表面染色(可选):收集细胞后,每管加入50ul表面染色缓冲液和适量体积的表面抗体,充分重悬细胞,4℃,避光孵育30 min后,加入500 ul表面染色缓冲液,300g×5min,4℃离心,弃去上清液;
使用涡旋振荡仪震荡细胞沉淀,使其松散。
向每管细胞中加入500ul Fix/Perm工作液,充分重悬细胞,2-8°C避光孵育30分钟;
注:建议细胞密度不高于10^7/ml。
向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液;
600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;
每管加入100ul 1X N-Perm/Wash Buffer工作液和适量体积的胞内抗体,充分重悬细胞;
2-8°C避光孵育1h以上或过夜;
向每管细胞中添加1ml N-Perm/Wash Buffer工作液,洗去未结合抗体,600g×5 min离心,4℃,弃去上清液;
重复洗涤一次。
将细胞重悬于300-500ul N-Perm/Wash Buffer工作液进行上机分析。
注:在室温下保存时,样品应在2小时内进行上机分析;在2-8°C下保存时,应在24小时内分析样品
常见问题及提示:
Fix/Perm Diluent与N-Perm Wash Buffer (10X)的颜色因批次而异,并且可能包含可见的沉淀,这不会影响产品的性能。
本品不适用于磷酸化核内抗原的检测。
用户需根据不同细胞的要求在核内染色之前预处理细胞。
一些试剂包含甲醛和叠氮化钠,请穿戴实验防护服、手套、口罩等必要的防护装备。