
外泌体蛋白质组学(TMT/iTRAQ)
- YZEXO-12
- 研载生物
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- 2022-07-21 16:15:07
研载生物科技(上海)有限公司
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外泌体蛋白质组学(TMT/iTRAQ)
一、技术简介
外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。外泌体可携带蛋白质、脂类、核酸(miRNAs,ncRNAs)等多种生物功能大分子,通过质谱的高通量蛋白质组学研究外泌体中蛋白组成及对蛋白进行定量分析。
基于质谱的TMT/iTRAQ标记技术可以快速、轻松实现蛋白的相对定量,用于复杂体系中生物标志物的筛选。TMT/iTRAQ标记试剂盒是比较正常、疾病以及药物治疗后样本间的表达差异,研究时间进程中的蛋白变化,比较生物重复间的不同以及提供蛋白相对定量的理想工具。
二、实验流程
1. 样本准备
2. 蛋白酶解
3. TMT/iTRAQ标记
4. 高pH反相分离
5. nanoUHPLC-MS/MS分析
6. 数据分析
三、数据分析
1. 定性定量质控及结果
2. 鉴定及差异蛋白统计作图
3. GO功能分析
4. KEGG通路分析
5. KOG(COG)分析
6. STRING-DB蛋白相互作用网络
四、服务说明及结果
1. 客户提供:外泌体或由我司提取外泌体。
2. 公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期:40个工作日。