产品简介

本试剂盒专为小鼠快速基因型鉴定而研制，能够迅速从小鼠尾巴、耳朵或脚趾等组织中释放足量的基因组DNA，消化时间仅需15分钟，无需抽提与纯化，可直接将消化产物作为模板进行PCR扩增。试剂盒中配有高扩增兼容性的2xDet PCR SuperMix (Dye+)，PCR反应时只需加入引物和模板即可进行扩增，扩增产物可直接点样电泳。PCR产物的3’端带”A”，可进行TA克隆。

建议组织用量(以50 μl反应体系为例)

• 3~5 mm小鼠尾尖


• 5~10 mm²小鼠耳朵


• 1~2个小鼠脚趾

质量控制

25 μl PCR反应体系中，以1 μl小鼠尾巴裂解产物为模板，扩增小鼠gapdh基因，30个循环后取产物5 μl进行1%琼脂糖凝胶电泳，可见有单一的2 kb条带。

操作步骤

1 按小鼠数量配制组织消化液，每个样本采用40 μl DS1与10ul DS2混合。现用现配。

2. 向每个含有样本的EP管中加入50 μl新鲜组织消化液，55°C水浴/金属浴中消化15 min。组织消化时，务必将组织完全浸没于消化液中。消化完成后，组织外观上仍然完整，但足量的基因组DNA已 经释放，不影响后续的PCR实验。

3. 将样本置于95°C水浴/金属浴中孵育5 min以灭活消化液中的蛋白酶。12000 rpm离心5min，取上清作为PCR模板。消化后的上清可于-20℃保存三个月。

应用实例





* 最好于低温下配制，试剂全部加好后，瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

*结果检测：反应结束后取5 µl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。



注意事项

1. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

2. 提取物4°C可保存3个月, -20°C可保存6个月。

实验流程图