细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白提取试剂盒
产品货号：26141
产品规格：50次/100次
产品简介：
本试剂盒用于分离提取真核细胞的细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白。
产品内容：
产品名称 包装 储存条件
Harvest Buffer 25ml/50ml (使用前加入 25μl/50μl DTT 溶液) 4℃保存
Buffer A 25ml/50ml (使用前加入 25μl/50μl DTT 溶液) 4℃保存
Buffer C 100ml/200ml (使用前加入 100μl/200μl DTT 溶液) 4℃保存
DTT 溶液 0.5ml/1ml -20℃保存
操作步骤：
1. 收集 10
6-5×10
6个细胞于 1.5ml 离心管中，用 PBS 清洗。
2. 将细胞重新悬浮于 250-500μl Harvest buffer 中，冰上孵育 5min。
3. 1000rpm 离心 10min，收集上清至新离心管中，同时留沉淀。
4. 12000rpm 离心 15min，收集上清至新离心管中（此部分溶液包含胞浆蛋白和膜蛋白）。
5. 将步骤 3 中沉淀重悬于 500μl Buffer A 中，1000rpm 离心 5min，弃上清。
6. 加入 4 倍体积 Buffer C，4℃涡旋（或反复涡旋/冰上孵育）15min。
7. 4℃，12000rpm 离心 10min。
8. 收集上清至新离心管中（此部分溶液包含核蛋白）。
注意事项：
1. 需自备 PMSF。PMSF 一定要在抽提试剂加入到样品中前 2-3min 内加入，以免 PMSF 在水溶液中很快失效。
PMSF 可以向本公司订购。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或 4ºC 进行。
3. 本试剂盒对于细胞样品，仅适合于真核细胞。
4. 使用本试剂盒抽提到的蛋白可直接用本公司生产的 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用
Bradford 法测定蛋白浓度。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住
宅内。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。