TRAP染色试剂盒
TRAP Staining Kit
- PMK0467
- PUMOKE
- 湖北省武汉市
- 现货
- 60次
- 450元
- 2022-07-22 15:20:02
武汉普美克生物科技有限公司
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- 英文名称
- TRAP Staining Kit
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- TRAP染色试剂盒PMK0467
- 溶液
- 1盒
货号:PMK0467
保存:2-8℃保存,有效期3个月。
规格:60T
产品简介:
本试剂盒适用于细胞涂片、细胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰冻切片及石蜡切片等的染色。阳性反应为鲜红色或深红色颗粒,定位于胞浆当中。
产品组成:
操作步骤:
工作液的配制:
1.底物反应液一配制:使用前用移液器将试剂B吸入试剂A中,溶解混匀,配成甲液;将试剂D吸入试剂C
中,溶解混匀,配成乙液。将甲液和乙液混匀即成底物反应液一。
2.底物反应液二配制:使用前用移液器将试剂F吸入试剂E中,溶解混匀,即成底物反应液二。
3.底物反应液四配制:使用前用移液器将试剂I吸入试剂H中,溶解混匀,即成底物反应液四。
4.底物孵育液的配制:在染色缸中加入30ml蒸馏水,37℃水浴10分钟。将底物反应液-一、二、三、四依次加入已预温的蒸馏水中混合并充分混匀。样本的染色处理:
一、血涂片及骨髓涂片
1.推片:取全血或骨髓3ul左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30°角,置于血滴正前方,稍微往后移与血滴接触,血滴沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血滴铺完血膜为止。不要太薄,以免细胞太少,也不要太厚,以免太重叠。
2.固定:让涂片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
3.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
4.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
二、细胞涂片及细胞爬片
三、
1.固定:将细,跑涂片或细胞爬片放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗四、
2.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
3.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
三、冰冻切片
1.回温:将保存在一20"C冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37°C孵箱中进行回温,或者将切片架放置在一一个小盒子中,将盒子置于37C水浴锅中进行回温。
2.水合:将回温好的切片,水中浸泡1-2分钟。
3.固定:让切片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
4.孵育:水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2--3分钟,两者任选其一-即可。
四、石蜡切片
1.脱蜡:二甲苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡5-10分钟。
2.无水乙醇浸泡5分钟。再分别用90%、70%乙醇各2分钟。
3.水合:蒸馏水中浸泡2分钟。
4.孵育:还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5.复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
染色结果:
阳性反应为鲜红色或深红色颗粒,定位于胞浆中
注意事项:
1.使用前请仔细阅读说明书
2.所有的工作液请使用前新鲜配制,配制后立即使用,一次使用完
3.石蜡切片不需要固定。
4.水洗后不要太干即放入孵育液中孵育,太干后染色效果会变差。
5.用底物孵育液孵育时要注意避光。
6.如果样本为骨片的石蜡切片,不可用酸脱钙法脱钙,酸脱钙对蛋白质的影响较大,使细胞中的特异性酶失活,从而影响特异性的酶染色,导致酶不能跟底物结合,会使染色失败。请使用其他对蛋白质的影响小的脱钙方法。
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