【产品名称】细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC/PI 双染法）
【产品型号】AP 10
【包装规格】
25 测试/盒 
【预期用途】
用于确定分散细胞样本中，细胞早期凋亡及晚期凋亡的比例。
【检验原理】
    在细胞凋亡的早期阶段，细胞膜仍然保持完整，但细胞膜双脂质层的不对称性特征消失，内层的磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，PS）从膜的内部向外部移位，从而使 PS 暴露于细胞膜外层。Annexin V 是一种 35-36 KD 的 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，对 PS 具有高亲和力，用荧光染料如 FITC 事先将 Annexin V 标记，即可利用 Annexin V-FITC 对暴露于细胞外表面的 PS 进行染色，以检测早期凋亡的发生。

    同时，利用活细胞具有完整的细胞膜，碘化丙啶（PI）等荧光染料不能透过细胞膜进入到细胞内部的特性，PI 不能对活细胞核内的核酸进行染色。而对于那些已经坏死和处于凋亡晚期的细胞，由于细胞膜的完整性已经受到不同程度的损害，PI 可以渗入细胞内部对核酸染色。因此，利用 Annexin V-FITC 对早期凋亡细胞膜表面特征性 PS 进行识别，利用 PI 染料对细胞膜的完整性进行区分，流式细胞仪即可将早期凋亡细胞与晚期凋亡细胞以及坏死细胞分群，达到分别测定的目的。

【储存条件及有效期】
储存条件：避光置于 2℃～8℃环境下保存。
有效期：未开封试剂盒自生产日期起，在 2℃～8℃避光环境下可稳定保存 18 个月；试剂开瓶使用后，在 2℃～8℃避光环
境下可保存 6 个月。
【适用仪器】
带有 488 nm 激发光源的流式细胞仪。如 Beckman Coulter 公司的 DxFLEX 和优利特 BF-700 B4R2、BF-700 B5R2、BF-700 B5R3机型的流式细胞仪。
【样本要求】
1. 本试剂盒适用于检测培养的悬浮细胞或贴壁细胞[1]，不适用于检测组织样本。
2. 流式细胞仪检测时，待分析样本细胞的总数量应不低于 1×105个，合适的样品浓度范围为 5×105至 5×106细胞/mL。
3. 待检测细胞样本经过诱导凋亡、洗涤离心后即可染色检测，无需对细胞进行固定操作。
4. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，并且分别设置 Annexin V-FITC、PI 单染管，进行荧光补偿的调节。
5. 细胞凋亡是一个动态的过程，染色完成后宜在 1 小时内尽快完成检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
6. 细胞培养时需避免细菌或真菌污染，否则会对研究结果造成干扰。