什么是充质干细胞?它的实验步骤又是怎样的?
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充质干细胞是干细胞的一个研究分支,干细胞是一种具有自我复制和多向分化能力的细胞。它们可以不断自我更新,在特定条件下转化为一个或多个构成人体组织或器官的细胞。干细胞是人体的起源细胞,是构成人体各种组织器官的祖细胞。
充质干细胞是一种存在于多种组织(如骨髓、脐带血和脐带组织、胎盘组织、脂肪组织等)中的成体干细胞,具有多向分化潜能,是非造血干细胞。这种干细胞可以分化成多种间充质细胞(如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞等)或非间充质细胞,具有分化潜能,具有*的细胞因子分泌功能。细胞模型已应用于增殖、移植和分化的研究,以及体外免疫反应的鉴定。
1、对于塑料的粘附,细胞具有壁粘附性。
2、特异性表面抗原表达——阳性和阴性标记。
3、多能分化,可在体外分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。
充质干细胞实验步骤:
1、从-196℃液氮罐中取出一根间充质干细胞冻存管。
2、立即将冻存管放入37℃水浴中匀速摆动约一分钟,直至管内只剩下最后一块晶体(注意:不要让水通过产品管)。
3、用酒精擦拭喷嘴。
4、离心管中加入20ml完全培养基,将融化的细胞悬液加入完全培养基中,混匀。
5、取20ul充分混合的细胞悬液,用细胞计数器计数。
6、细胞悬液1400rpm,室温离心5分钟,去除上清。
7、加入10-20ml完全培养基,轻轻混匀细胞。
8、向每个T225细胞培养瓶中加入50ml完全培养基。
9、按10000-15000个细胞/cm2接种细胞,水平摇动使细胞分布均匀,显微镜下观察细胞分布,于37℃、5%CO2培养箱中培养
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