不要沉淀，要美观！——浅谈血清沉淀

在细胞培养中，血清的品质在一定程度上可以影响到细胞培养的成败，如果血清中出现沉淀，不免会让人担心细胞会不会因为沉淀而出现问题。所以，关于血清沉淀，小编和大家分享以下几点内容。
一、血清沉淀物到底是什么？
常见的血清沉淀有以下几种：
        纤维蛋白：纤维蛋白是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1~2mm，可以用肉眼观察到。由于在生产过程中，血清采集、过滤和罐装处理都是在低温条件下快速完成的，血清中的纤维蛋白原处于溶解状态，但在解冻后，血清中的纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。
        磷酸钙：常见的一种沉淀物，会造成血清浑浊，并且在37℃培养的时候会增加，这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此通常会被误认为是微生物污染。
        其他：胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质也是血清中出现沉淀的常见原因。
二、血清沉淀物对细胞培养有什么影响？
        血清出现沉淀是血清的正常特性，经过我们的试验以及细胞培养经验表明，血清沉淀物不会影响细胞培养。
三、血清沉淀物是不是污染？
        血清沉淀物中，磷酸钙往往会被误认为是微生物污染，特别是在37℃条件下培养后，可能会观察到更多的絮状沉淀，所以将血清放在培养箱中做无菌试验并不能直接判定血清被污染了。我们可以将血清加到细菌培养基中进行培养，观察是否有细菌生长，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察是否有污染。
四、血清沉淀物该怎么去除？
        血清中出现沉淀物后，可以将血清分装到无菌离心管中，以400~600g离心5min，将上清液加入到培养基中一起过滤。注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这很可能会堵塞过滤膜，并且直接过滤血清，也可能会导致血清中部分营养成分的流失。
五、如何避免血清中出现沉淀物？
1、采取正确的解冻方法
        （1）2~8℃过夜，使之部分融解
        （2）再放到室温条件下使之完全融解
        （3）在融解过程中需要规则地摇晃均匀
2、采取正确的使用和保存方法
        （1）非必要不灭活，热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出，影响血清品质
        （2）避免在37℃下预热血清，在室温条件下预热即可
        （3）使用过程中，避免反复冻融
        （4）避免紫外线照射
        （5）避免在2~8℃条件下长期保存，可以将血清分装后在-15~-20℃的环境中长期保存
        （6）避免在室温条件下放置太长时间