masson染色实验步骤及注意事项

一、masson染色实验步骤

• 石蜡切片脱蜡至水：

  依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

• 苏木素染细胞核：masson染色试剂盒内Weigert氏铁苏木素染5min，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，流水冲洗数分钟返蓝。
• 丽春红染色：masson染色试剂盒内丽春红酸性品红液染5-10 min，蒸馏水快速漂洗。
• 磷钼酸处理：masson染色试剂盒内磷钼酸水溶液处理约3-5 min。
• 苯胺蓝染色：不用水洗，直接用masson染色试剂盒内苯胺蓝液复染5min。
• 分化：1%冰醋酸处理1min。
• 脱水封片：将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。
• 显微镜镜检，图像采集分析。

  染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色；肌纤维、纤维素和红细胞呈红色；细胞核呈蓝黑色。

二、注意事项

• 苯胺蓝和丽春红要充分溶解然后过滤使用，不过滤的染液里面杂质过多，会阻碍染液和组织的结合紧密程度；
• 媒染后取出流水冲洗时间不宜过长，时间过长会导致染色效果整体偏淡；
• 丽春红染完后水洗速度要快，并且进入磷钼酸前尽量将水甩干；
• 1%的磷钼酸水溶液的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维、纤维素等仍呈鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与大分子染料的苯胺蓝液较易结合；
• 1%的磷钼酸水溶液要经常换，溶液明显变色了就需要更换了。

中科光华（西安）智能生物科技有限公司 是一家专业为生命科学研究提供一站式服务的新型高科技企业。公司拥有独立的病理学实验平台、免疫学实验平台、生化实验平台和生物信息学等平台。提供各种组织生物样本技术服务、研发、产品开发、生产和销售。公司引进的全套先进设备仪器建立了一整套以生物组织为主的产品以及技术服务。与国家、省级公共实验平台及国内知名高校生命科学研究实验室建立了广泛的合作关系。 拥有庞大的石蜡、冰冻组织芯片及组织库，拥有专业的技术服务团队，无论是形态病理学服务还是分子生物学服务，尤其是具有丰富的免疫组化实验经验，公司拥有一批生物医学背景、热爱生命科学研究的留美博士和国内知名高校的博士、硕士研究生、高级技师和经验丰富的实验操作技术人员组成，并由主任级病理医生出具实验报告，为客户提供最可靠最优质的服务体验。公司承接整体课题研究，可开展分子生物实验技术、细胞实验技术、病理实验技术、荧光原位杂交技术等服务，并提供有关技术攻关、研发等相关服务。我们将致力于全心全意为各大知名企业，高校，研究所及医院提供优质的服务。

自设阴对

组织芯片示例